identificação, absorção ultravioleta 197u - soluções— preparar uma solução de nicotina em água com uma concentração de cerca de 1 mg por ml. transfira 1,0 ml desta solução para um balão volumétrico de 50 ml, dilua com 0,1 n de ácido clorídrico em volume e misture para obter a solução de teste. transferir uma quantidade de bitartarato de nicotina usp di-hidratado rs, equivalente a cerca de 50 mg de nicotina, para um tubo de 25 ml com rolha de vidro. adicione 5 ml de hidróxido de amônio 6 n, 2 ml de hidróxido de sódio 1 n e 20 ml de n -hexano. agite por 5 minutos, deixe as fases se separarem, transfira a parte superior n -hexano para um frasco e evaporar com uma corrente de gás nitrogênio. [ Nota- evite secagem excessiva para evitar a perda de nicotina. ] dissolver o resíduo da nicotina assim obtido em água para obter uma solução com uma concentração de cerca de 1 mg por ml. dilua 1,0 ml desta solução com ácido clorídrico 0,1 n a 50,0 ml e misture para obter a solução padrão.
pureza cromatográfica solução de teste- dissolver cerca de 0,13 g de nicotina, pesada com precisão, em diclorometano, diluir com diclorometano até 25,0 ml e misturar.
soluções de referência— diluir volumes medidos com precisão do solução de teste quantitativamente e gradualmente, se necessário, com diclorometano para obter solução de referência a e solução de referência b tendo concentrações de cerca de 26 µg por ml e 52 µg por ml, respectivamente.
sistema cromatográfico (Vejo cromatografia 621 ) - o cromatógrafo a gás está equipado com um detector de ionização de chama mantido a 270 e uma coluna de sílica fundida de 0,53 mm x 30 m ligada com uma camada de 1,5 µm da fase g1. o hélio é usado como gás de arraste a uma vazão de 20 ml por minuto. a temperatura da coluna é mantida em 50 por 6 segundos e depois programado para subir de 50 a 250 às 6 por minuto e, finalmente, mantida isotérmica a 250 por 3 minutos.
procedimento- injetar separadamente volumes iguais (cerca de 1 µl) do solução de teste , solução de referência a e solução de referência b no cromatógrafo e permita que o solução de teste eluir por, pelo menos, 2,5 vezes o tempo de retenção da nicotina. registre os cromatogramas e meça todas as respostas de pico. a soma das respostas de pico, excluindo a da nicotina, da solução de teste não é mais do que a resposta da nicotina de solução de referência b (1,0%), e nenhum pico de resposta é maior que o da resposta de nicotina de solução de referência a (0,5%).